2D Micro-HPLC系统进行蛋白质组分析

详细说明

需要高生产率高性能的蛋白质组分析

高性能2D Micro-HPLC系统可进行复杂肽组分的分离,其灵敏度和分离度都可超过目前的要求。将一维中的阳离子交换色谱与二维中的毛细管反相色谱进行结合,并利用6个捕集柱,可独立优化不同的分析条件。这也使大量消化物中痕量肽的分离分析成为可能,因此可作为具有低显示水平的未知蛋白质探索的极为有效工具。配置了电喷雾离子源接口(ESI)的质谱仪具有无可比拟的性能及灵敏度。

特征

1. 在二维凝胶电泳中不能分析的蛋白质在此仪器中可进行分析。

高离子蛋白和疏水性蛋白质可在线分析。

2. 低显示水平的蛋白质可进行高分离度和高灵敏度的自动分析。

蛋白质消化物可置于自动采样器中进行自动分析。其灵敏度可满足痕量肽分析要求,而在2-D凝胶中是不可检测的。

3. 在线样品捕集和随后RPHPLC进行的自动化脱盐可确保稳定的分析。

阳离子交换柱中的样品在6个迷你捕集柱中捕集(反相柱中的聚合物的保留力等同于C4)并伴随后续的反相分离进行脱盐。此方法确保了稳定高精准分析。

分析实例

此分析结果为6种蛋白质(1 pmol)混合物胰蛋白酶消化的分析结果,如下图3所示。 为了对比区分,最上面的色谱图为1D LC-MS的分析结果,最底端交叠的色谱是二维分析中反相LC-MS的分析结果。在一维分析中对每一种蛋白质的分析。从中可见,运用此系统可大大改进肽的分离度水平。

初级洗脱使用的盐是硫酸铵。每一个消化物的浓度分别为1mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM, 50 mM和 99 mM。

根据美国国立卫生研究所,美国心理健康研究所与岛津达成的CRADA协议,岛津公司一直致力于参与蛋白质组分析的多维HPLC系统的联合研发过程。

CRADA:
合作研发协议(是一个官方的联合研究项目,通常由美国卫生与人力服务部下属的科研机构,一个公司和其他的科研机构共同完成)

NIMH:
美国心理健康研究所



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